1. 装袋

（1）菌种的材料准备好后可以将其全部混合均匀，再加入清水，当含水量达到65%时即可装袋。

（2）装袋要求松紧一致，要清理袋内外沾染的原料，然后再塞上棉塞，等待羊肚菌发酵。

2. 灭菌

（1）羊肚菌菌种一定要经过灭菌后才能使用，首先将其放在0.68千克压力下维持1小时，然后再转入常压100°C的温度下保持6-8小时即可。

（2）灭菌时间不能过长或者压力过高，否则会破坏羊肚菌菌种的养分。

3. 接种

（1）接种选择在超净工作台上进行，点燃酒精灯，打开封口纸和接种封口膜，把菌种瓶口控制在酒精灯火焰的高热量范围内进行接种。

（2）接种要求同母种试管接种时一样，要对接种箱进行消毒，每支母种可接5-10瓶原种，一瓶原种可接50-100袋栽培种。

4. 降温

（1）接好的原种或栽培种放在12~18℃环境下培养，放置时瓶与瓶(或袋与袋)之间保持2cm间距，不能紧挨以防过热.

（2）测温应在瓶堆中间(或袋内)进行。

5. 培养

（1）原种约20天可长满，栽培种约25天可满，然后进行下地播种。

（2）栽培种长满菌丝应马上使用，在非冷藏条件下切不可过长时间存放。